核酸清除試驗(yàn)

中科檢測可以針對核酸去除劑、核酸清除劑、核酸降解劑、核酸降解儀等核酸清除產(chǎn)品檢測，開展核酸氣溶膠污染的空氣清除試驗(yàn)檢測。

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核酸清除試驗(yàn) 試驗(yàn)背景

核酸檢測技術(shù)已成為血液篩查實(shí)驗(yàn)室的重要實(shí)驗(yàn)手段，但因其靈敏度高的特點(diǎn)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室也容易受到污染，特別是核酸的氣溶膠污染比較嚴(yán)重。
在新冠病毒核酸檢測過程中，常見以下幾種污染類型：擴(kuò)增片段的污染（產(chǎn)物污染）；天然基因組 DNA的污染、試劑污染（貯存液或工作液）以及樣本間交叉污染。
核酸檢測實(shí)驗(yàn)室污染的主要來源是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。目前國內(nèi)所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力，大部分醫(yī)院也設(shè)立了PCR 實(shí)驗(yàn)室，高強(qiáng)度的核酸檢測任務(wù)已成為了檢驗(yàn)員的工作常態(tài)，如果一旦出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室核酸污染，可能會(huì)造成假陽性的結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可信，甚至可能會(huì)危及實(shí)驗(yàn)室工作人員安全。核酸實(shí)驗(yàn)室污染后難以清除，有可能造成實(shí)驗(yàn)室不能使用的風(fēng)險(xiǎn)。
如果一旦出現(xiàn)核酸實(shí)驗(yàn)室污染，除了常規(guī)的清潔消毒方法之外，還可以進(jìn)行通過空間滅菌方法進(jìn)行核酸清除試驗(yàn)。

核酸清除試驗(yàn) 試驗(yàn)對象

中科檢測可以針對核酸去除劑、核酸清除劑、核酸降解劑、核酸降解儀等核酸清除產(chǎn)品檢測，開展核酸氣溶膠污染的空氣清除試驗(yàn)檢測。

核酸清除試驗(yàn) 試驗(yàn)方法

1.核酸清除試驗(yàn)檢測設(shè)備
3m³試驗(yàn)艙、二級生物安全柜、熒光定量PCR儀、渦旋混勻器、低溫冰箱、低溫高速離心機(jī)、PCR專用微量移液器、水浴鍋。
2. 核酸清除試驗(yàn)試劑耗材
病毒DNA/RNA提取試劑盒、ASFV基因質(zhì)粒熒光定量qPCR試劑盒、TE緩沖液、96~100%乙醇、超純水、去RNA酶水、PBS溶液等。
3. 核酸清除試驗(yàn)步驟
1）樣品配制：根據(jù)客戶要求倍比稀釋，待用；
2）將稀釋好的核酸降解劑加入到消毒噴霧設(shè)備中，將設(shè)備放入3m3試驗(yàn)艙中，連接電源并設(shè)置好噴霧程序，待用；
3）試驗(yàn)樣品的制備：在對照組和樣品組植絨棉簽上各加50μL陽性對照，固定在EP管架上待其自然風(fēng)干；
4）將其中對照組植絨棉簽放置在室溫下（不熏蒸），樣品組植絨棉簽固定在EP管架上放入試驗(yàn)艙中，關(guān)緊艙門；
5）通過橡膠手套按下消毒噴霧設(shè)備的啟動(dòng)鍵，噴霧10min，待噴霧結(jié)束后開始計(jì)時(shí)；
6）靜置密閉2h后，通過傳遞艙將試驗(yàn)組的植絨棉簽取出，開啟凈化30 min；
7）將每支植絨棉簽在1mL離心管中各自用1mLTE緩沖液進(jìn)行洗脫，取200μuL進(jìn)行核酸提取；
8）配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后進(jìn)行qPCR試驗(yàn)。
4. 結(jié)果計(jì)算